应用酶联免疫吸附试验检测肠出血性大肠杆菌0157:H7方法研究

宋志荣；王利民；郭宏；孙克江

关键词：肠出血性大肠杆菌0157:H7, 酶联免疫吸附实验(ELISA), 大肠杆菌, 胃肠出血

摘要：目的制备和纯化0157:H7抗原,免疫家兔和豚鼠,获得高效价的抗0157:H7免疫血清并进行纯化及酶标记.建立对0157:H7感染患者快速诊断方法,做到早期发现及时治疗,有效控制疫情的蔓延.方法ELISA双抗体夹心法检测0157:H7抗原.步骤:包被特异性抗体,加处理后的粪便等标本,然后加入抗0157:H7酶结合物,后加入底物显色.结果本课题所研制的抗0157:H7酶结合物只对0157:H7呈阳性反应,而与其他相关细菌无交叉反应.结论应用酶联免疫吸咐试验(即双抗体夹心法)对肠出血性大肠杆菌0157:H7抗原的检测较常规法实验程序简捷、快速、敏感.临床和现场验证结果表明,其方法具有灵敏度高,特异性强操作简单等特点,为肠出血性大肠杆菌0157:H7的鉴定及快速诊断提供了一种新的检测手段.