焦磷酸测序技术及其应用进展

倪红兵；王惠民

关键词：焦磷酸测序技术, 序列分析技术, 生命科学研究, 脱氧核苷酸, 荧光分子, 荧光标记, 细管电泳, 系统检测, 单向反应, 测序反应, 全自动, 链终止, 光信号, 应用, 验证, 平板, 能力, 发光

摘要：DNA序列分析技术是现代生命科学研究的核心技术之一,而双脱氧核苷酸链终止法(Sanger法)是目前使用普遍的DNA序列分析技术.在基于Sanger法的全自动DNA测序技术中,测序反应产生的DNA片段是荧光标记的,这些片段经过平板胶电泳或毛细管电泳得到分离,荧光分子被激发而发光,发出的光信号被检测系统检测.Sanger法的优势在了可以分析未知DNA的序列,且单向反应的读序能力较长,目前的技术可以达到1000bp以上.在实际工作中,很多情况需要对已知序列的DNA片段进行序列验证,而这种分析往往测几十bP就可以满足需要.在这种情况下,Sanger法未必是合适的DNA序列分析技术.新发展的焦磷酸测序技术(Pyrose-quencing)应该是目前适合这些应用的DNA序列分析技术.