期刊简介
本刊始终贯彻理论与实践相结合的方针，以山东为重点，面向全国，主要报道医学检验专业领域中的研究成果，促进国内外学术交流。
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首页>医学检验与临床杂志
- 杂志名称：医学检验与临床杂志
- 主管单位：山东省卫生厅
- 主办单位：山东省千佛山医院
- 国际刊号：1673-5013
- 国内刊号：37-1443/R
- 出版周期：双月刊
期刊荣誉：中国期刊全文数据库(CJFD)期刊收录：知网收录(中), 万方收录(中)
人B细胞激活因子受体-BAFF-R基因mRNA实时荧光定量PCR标准品的构建
赵丽；张冬雷；孙竹华；鞠少卿
关键词：B细胞激活因于受体, 标准品, 构建
摘要：目的构建实时荧光定量PCR(RFQ,-PCR的标准品以定量检测人B细胞激活因子受体.BAFF-R基因mRNA的表达.方法在BAFF-R基因高保守区设计了特异性的引物和荧光探针,用RT-PCR法从人外周血单个核细胞的总mR-NA中逆转录扩增BAJFF-R的cDNA,将纯化的BAFF-R cDNA与PGEM-T载体进行连接,转化宿主菌DH-5α,然后提取重组质粒DNA,用限制性核酸内切酶EcoR Ⅰ进行酶切鉴定并测序分析,后对质粒标推进行实时荧光定量PCR检测.纯化质粒并检测260nm吸光度,确定原被的重组质粒拷贝浓度并以此制备荧光定量PCR梯度浓度标准品.结果酶切鉴定、PCR扩增及测序分析均证实TNF-αcDNAn重组到PGEM-T载体上.结论成功克隆了BAFF-R实时荧光PCR定量标准.
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